Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh giống cây Xạ đen (Ehretia asperula Zoll. Mor). tại trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)

NG

(Ehretia asperula Zoll. & Mor.)
IN VITRO

C

o:

Chính quy

Chuyên ngành:
Khoa:

CNSH - CNTP
c:

2011 - 2015

Thái Nguyên -


NG

EN
(Ehretia asperula Zoll. & Mor
IN VITRO

Chính quy
Chuyên ngành:
Khoa:

CNSH - CNTP
K43 - CNSH
2011 - 2015
TS. Ngô Xuân Bình

Khoa

Thái Nguyên -


i

Tôi xin

chân thành

T

lâm
tôi

Em

Ks.
em
.

só

Thái Nguyên, ngày 05 tháng 06


ii

.................................................11
...............................................19

in vitro
3

......21
2

in vitro
4: Nghiên c u

ng c

kh

ng nuôi c

iX

......22
n

..................................................................23

5:

.............23

6: Nghiên

................24

7: Nghiên

...............24

8:

in vitro....25

9:

in vitro... 25

10:
...........................................................26
:
in vitro

.......29
2

in vitro
ng

ng c
iX

........30
ng MS, ½M

n kh

n nuôi c y)......................................31

...............................................................33

...................................................34

...................................................36


iii

in vitro (sau 4
..........................................................................................38

in vitro

...............................................................39

(sau
........................................................................................41

iv

H
..................................................................................................4
................................................................................................4
Hình 2.3:

.............................................................................................5
......................................................................................6

.................................................................................................32

.............................34

KIN khác nhau

......................................................35

......................................................36
..........39
Hình 4.6: R cây X

ng MS có b sung IBA các n

...........40

...........................................42

v

B5:
BA:

6- Benzylaminopurin

C n:

C2H5OH

Cs:

C ng s

CT:

Công th c

CV:

Coefficient of Variation
i ch ng

HSN:

H s nhân

KIN:

6- Furfuryaminopurin

LSD:

Least Singnificant Difference Test

MS:
MT:

ng

NAA:

Naphlene axetic acid

Nxb:

Nhà xu t b n

RE:

Robert Ernst

TDZ:

Thidiazuron

TLMC:

T l m u ch t

TLMSKN:

T l m u s ng không nhi m

TLMSN:

T l m u s ng nhi m

WPM:

Wood Plant Medium


vi

......................................................................................................1
............................................................................................................1
1.2.

................................................................................................2
................................................................................................2

1.4. Ý

.................................................................................................2
...........................................................................3
......................................................................................3

2.1.1.

.................................................................................3
..................................................................................4
......................................................................4

2.2.

cây
kinh

..........................................................................................6
............................................................................................6
.............................................................................................6
............................................................7
..........................................................8
.............9
in vitro.............................................14
....................................................15

2.5. Tình hình nghiên

.....................................16
.............................................16
............................................18

.

......19
......................................................................19
......................................................19

........................................................19
..........................................................................................20
....................................................................................20


vii

3.5.1.
20
3.5.2. N i dung 2: Nghiên c u

ng c

n kh

iX

ng nuôi c y MS, ½MS,

........................................................22

................................................................................23
3.5.4.
in vitro ......................................................................24

......................................................25
..............................................................26
.

...................................................................28

1% và HgCl2
.................................................................................................28

in vitro

................... 28
2

in vitro
ghiên c u
n kh

ng c
iX

(sau 1 tu n nuôi c y)..........29
ng nuôi c y MS, ½MS, B5, WPM,

(sau 2 tu n nuôi c y)..........................................31
ng nhân nhanh
..........................................32

4.3.1.

nhân
.........................................33

4.3.2.
............................34

......................35


viii

4.4.
.......................................................................................37
in
vitro (sau 4

.....................................................................................37
in

vitro

.....................................................................................39

theo dõi).....................................................................................................................41
.

..................................................................43
..............................................................................................................43

5.2.

............................................................................................................43
......................................................................................44
..............................................................................................................44
.............................................................................................................45

1

Ehretia asperula Zoll. & Mor.)

là cây Dót.

-

Vì...

hiên

-

d

in vitro-

.

(Ehretia asperula
in vitro .


2

1.2.
Ehretia

asperula

lâm Thái

pháp in vitro.

vô trùng tái sinh in vitro.
-

tái sinh
X

- Xác

-

-

1.4. Ý
-

in vitro.
-


3

Ehretia asperula Zoll.
T

Ngành :

Magnoliophyta
Magnoliopsida
Solanales
Borraginaceae
Ehretia

Chi:

Ehretia P.
E. acuminata R. Br.; E. asperula Zoll. &
Mor.; E. dichotoma Blume; E. dicksonii Hance.; E. laevis Roxb.; E. longiflora
Champ. ex Benth. và E. tsangii
Ehretia asperula Zoll. & Mor. [7], [15].
này có hình dáng g


4

hoàn toàn [5].

2.1.2.1 Thân, lá

trung bình 5-


5

Hình 2.3:

-

ông

-1,4 cm [6].

-10 cm,
-

-10 mm.
-

3,5-4 mm,
-

dài 3,5mm [5].

-4


6

2.2.

cây
kinh

[5].

-

[5].

[7], [13].


7

[13], [22].

in vitro
in vitro

].

[2].


8

in
vitro

in vitro

in vitro

khác nhau [10].
2.3.1.2 Tí

Hab


9

2.3.2. M

V t li u nuôi c y là ngu n nguyên li u kh

u cho nuôi c y mô t bào

th c v t. V t li u dùng cho nuôi c y mô-t bào th c v t có th là h u h
quan hay b ph n c a cây (ch i ng n, ch i bên, phi n lá), các c u trúc c a phôi (lá
m m, tr lá m

tr (c , thân r ) [18].
ng thông tin di truy

u trúc mô khác nhau

trên cùng cây có th phát sinh các hình thái khác nhau trong quá trình nuôi c y, vì
v y vi c l a ch n v t li u nuôi c y ph
m u, ch

ng cây l y m

vào tr ng thái sinh lý và tu i c a
c và v trí l y m u, m

nuôi c y [16].

M u nuôi c

y ph

c

ph bi n nh t trong vô trùng m u c y hi n nay là s d ng hóa ch t có kh
tiêu di t vi sinh v t. Hóa ch
ki n: Có kh

c l a ch

vô trùng m u ph

t vi sinh v t t t và không ho

qu vô trùng tùy thu c vào th i gian, n
vi sinh v t c a hóa ch t. M t s hóa ch

mb

u

i v i m u. Hi u

và kh

tiêu di t
c s d ng hi

vô

trùng m u là: Ca(OCl)2-hypoclorit canxi, NaOCl-hypoclorit natri, oxy già, HgCl 2th y ngân clorua, ch


10

+

u ki n vô trùng
in vitro

in
vitro [16].

+

-18 h/ngày [16].

a)
Mô và

in vitro


11

b)
Ca, Na, S [10].

3

+
4

Phospho
Kali

3,

KH2PO4, KCl.6H2O

Canxi

3.4H2O,

Magie

4
4

- Nguyê

c) Vitamin

- Vitamin B1
acid [18].

CaCl2.6H2O, CaCl2.2H2O

12

- Vitamin B6
- Vitamin B3
- Myo-

ào,

d)
-

e)

-

-


13

-

tr

GA3

10].

14

f)

-

g)
-

Tr

in vitro

in vitro.

in vitro

2.3.3.3 Nhân nhanh


15

-

th
in vitro
in vitro

-

in vitro

.