NUÔI CẤY TẾ BÀO GỐC

D. NUÔI C Y T BÀO G CẤ Ế Ố
∗
Mu i vô cố ơ
∗
Carbohydrate, acid béo, amino acid
∗
Vitamine
∗
Y u t vi l ngế ố ượ
∗
Huy t thanhế
Thành ph n môi tr ng nuôi c yầ ườ ấ
1. Nuôi c y s c pấ ơ ấ

Là quá trình nuôi c y đ c th c hi n tr c ấ ượ ự ệ ự
ti p t m nh mô ban đ u đ n khi c y chuy n ế ừ ả ầ ế ấ ề
l n th nh tầ ứ ấ

G m các b c: thu nh n mô ồ ướ ậ  tách r i các ờ
t bào ế  nuôi c y t bàoấ ế
2. Nuôi c y th c pấ ứ ấ

Là quá trình nuôi c y đ c th c hi n sau l n ấ ượ ự ệ ầ
c y chuy n đ u tiênấ ề ầ

G m các b c: lo i b môi tr ng cũ ồ ướ ạ ỏ ườ  r a ử
bình/đĩa nuôi  tách các t bào g c bám vào ế ố
đáy đĩa  pha loãng các t bào g c b ng môi ế ố ằ
tr ng m iườ ớ
Thu nh n và nuôi c y t bào g c t t y x ng chu tậ ấ ế ố ừ ủ ươ ộ
Đùi chu t v a đ c thu nh nộ ừ ượ ậ

R a t y x ng b ng dung d ch ử ủ ươ ằ ị
D’MEM và thu nh n huy n phù t ậ ề ế
bào
Thu nh n x ng đùi chu tậ ươ ộ
Lóc b ph n c và th tỏ ầ ơ ị
R a l i b ng dung d ch PBSử ạ ằ ị
C t b hai đ u x ng đùiắ ỏ ầ ươ
Nuôi t bào trong d ng c nuôi phù h pế ụ ụ ợ
Pha m u máu thu đ c v i dung d ch PBS/2mM EDTA theo t l 1:1ẫ ượ ớ ị ỉ ệ
Dùng pipette hút 15 ml dung d ch Ficoll_Hypaque vào ng ly tâm 50mlị ố
Rót nh 30 ml h n h p PBS và máu lên trên l p dung d ch ẹ ỗ ợ ớ ị
Ficoll_Hypaque sao cho không làm xáo đ ng b m t ộ ề ặ
Ficoll_Hypaque/m uẫ
Ly tâm 30’ 1500v\phút, nhi t đ phòngở ệ ộ
Tách t bào đ n nhân ra t pha gi aế ơ ừ ữ
R a 2-3 l n v i PBS/EDTAử ầ ớ
Tái huy n phù t bào trong môi tr ng nuôi c yề ế ườ ấ
Thu nh n và nuôi c y t bào g c t máu cu ng r nậ ấ ế ố ừ ố ố